尽管冷冻技术十分复杂,包括冷冻速率、融解速率、低温保护剂等许多内容,但冷冻保存的基本原则并不复杂。冷冻过程中,标本降到一定温度,时,先在标本周围形成冰晶,由于冰晶不能透过细胞膜,细胞内冰晶不能形成,围绕标本周围缓冲液中溶质浓度升高,形成一个渗透压梯度,细胞内的水向外转移,并继续在细胞外结冰,引起细胞进行性脱水皱缩。加入此类保护剂后,细胞内冰晶形成温度显著降低(大约- 40℃),使胚胎冷却速度减慢,细胞内冰晶形成减少,可以使细胞充分脱水收缩,提高细胞存活率。如采用人工诱导结晶,或采用两步冷冻法,低温保护剂所 ......