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[辅助检查](二)组织细胞固定

理想的细胞固定过程应该保护细胞形态的同时确保目的基因DNA或RNA序列。对于RNA-RNA原位杂交有效的固定剂是4%多聚甲醛和PLPD(磷酸缓冲液PBS、赖氨酸、过碘酸盐及重酪酸盐)。涂片细胞原位杂交固定步骤如下:用含有0.02%EDTA的PBS洗涤细胞一次,于0.1%胰蛋白酶中消化,收获细胞涂在载玻片上,计数。若检测RNA,固定于4%多聚甲醛(pH 7.0),在4℃下放置60min,PBS洗5min,系列乙醇脱水干燥,20℃保存。若检测DNA,固定在4%多聚甲醛16~24h,0.1mol/L Tris- ......

——《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
书名:《基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策》
栏目:基因组学与蛋白质组学实验技术及常见问题对策 > 第一篇 基因组学研究常用实验方法The Experimental Method Commonly Used i Genomic Researc > 第三章 分子杂交技术及常见问题对策(Molecular hybridization and strategies frequently asked questions) > 第一节 原位杂交技术 > 三、操作步骤
作者:郭葆玉
参编:
页码:89-90
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2010-12-01
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