[辅助检查]四、提高杂交特异性的对策

探针的复杂性和浓度.主要通过控制探针的浓度、杂交温度及杂交时间来实现。探针的浓度:总的来说,随探针浓度增加，杂交率也增加，非特异性杂交会增多。另外，在较窄的范围内，随探针浓度增加，敏感性增加。要获得较满意的敏感性，膜杂交中32P标记探针与非放射性标记探针的用量分别为5～10ng/mL和25～1000ng/mL。杂交最适温度:杂交技术最重要的因素之一是选择最适的杂交反应温度。若反应温度低于Tm 10～15℃，碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链，错配对减少。通常有三种温度可供实验，即最适复性温度、苛刻复 ......