[文献资料]一、高效液相色谱法与经典柱色谱法比较

高效液相色谱法与经典柱色谱法的主要差别在于分离效率的高低和是否分离分析一体化。具体来说，两者在固定相性质、形状及粒度、输液设备和检测手段等方面有较大的差异。根据范氏方程：H ＝ A ＋ B／u ＋ Cu，式中，涡流扩散相A ＝ 2 λ d p，传质阻力相C与d 2p呈线性关系，因此如果粒径d p降低，涡流扩散相和传质阻力相也降低，因而塔板高度降低，柱效提高。HPLC填料粒径一般为5～10 μ m，传质快，由于采用高压匀浆技术装柱，装柱均匀性好，涡流扩散小，因此HPLC柱效很高，比经典柱色谱高数百倍至数千倍，如25cm长的硅胶柱柱效可达2万理论塔板，能胜任复杂化合物的分离，峰容量大。