[文献资料]五、色谱柱的标定

对已制备好的凝胶柱，为确定它的分离范围，需用一系列已知相对分子量的标准品，来测定它们的洗脱体积，绘制M‐V e曲线或lg M‐V e曲线，这一操作称为“标柱”，如图11 － 15所示。通常用七八个分子量呈窄分布的标样，分别按不同分子量范围配制。由曲线的形状、线性范围和直线斜率，可评价凝胶柱的分离特性。凝胶渗透色谱柱常用有机溶剂作为流动相，因此，凝胶渗透色谱柱的标定所用标准样品。凝胶过滤色谱以水为流动相的主体，常用具有不同p H值的多种缓冲溶液作为流动相，因此凝胶过滤色谱柱的标定所用标准样品必须适用于含水流动相，常用的标准样品有葡聚糖、聚乙烯醇、聚苯乙烯磺酸盐及蛋白质［ 22 ］。