一根高效能的填充柱,不仅要选择合适的固定液和担体,还要掌握好固定液的涂布方法和色谱柱的填充技术。第四步(涂布固定液):称取担体适量置圆底烧瓶中,再按比例称取固定液适量,用有机溶剂溶解并转移至圆底烧瓶中,加有机溶剂使担体淹没,将圆底烧瓶置水浴中加热回流5~6小时,以除去担体孔隙中的气体,便于溶有固定液的溶剂渗入,再置旋转蒸发仪上。填充柱的柱管材料常用的有不锈钢管和玻璃管两种,内径2~6mm,长1~6m,U形或螺旋形。玻璃管有易碎的缺点,但其无金属离子的催化活性,适于对金属离子不稳定的药物的分析,此外玻璃柱便于观察填充情况。久未使用的填充柱在重新使用前也需要进行老化。
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