交替使用高速和超速离心的方法,将肝脏中沉降系数差别较大的组分分离,从而得到微粒体。将肝脏制备成20%匀浆后,于10000~12500 × g低温高速离心15~30分钟,可以将未破碎的细胞、细胞碎片、细胞核及线粒体沉淀下来,而微粒体存在于上清液中。将高速离心的上清液低温105000 × g超速离心60分钟,上清为胞浆部分,淡红色沉淀即为微粒体。按1∶4加入匀浆缓冲液(0 ﹒ 25mol/L蔗糖溶液或者Tris‐HCl缓冲液:50mmol/L Tris‐1.15%KCl,浓HCl调pH = 7 ﹒。将微粒体沉淀重悬于Tris‐HCl缓冲液(加入量以每克肝重1ml)。匀浆时最好采用手动匀浆器,而且应尽量避免产生太多泡沫,以免造成酶变性。
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