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一、肝微粒体的制备

交替使用高速和超速离心的方法,将肝脏中沉降系数差别较大的组分分离,从而得到微粒体。将肝脏制备成20%匀浆后,于10000~12500 × g低温高速离心15~30分钟,可以将未破碎的细胞、细胞碎片、细胞核及线粒体沉淀下来,而微粒体存在于上清液中。将高速离心的上清液低温105000 × g超速离心60分钟,上清为胞浆部分,淡红色沉淀即为微粒体。按1∶4加入匀浆缓冲液(0 ﹒ 25mol/L蔗糖溶液或者Tris‐HCl缓冲液:50mmol/L Tris‐1.15%KCl,浓HCl调pH = 7 ﹒。将微粒体沉淀重悬于Tris‐HCl缓冲液(加入量以每克肝重1ml)。匀浆时最好采用手动匀浆器,而且应尽量避免产生太多泡沫,以免造成酶变性。

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——《药理实验方法学》
书名:《药理实验方法学》
栏目:药理实验方法学 > 第三篇 药理实验常用放射与生化技术 > 第七章 常见药物作用相关酶学试验方法 > 第二节 药物代谢酶的测定方法
作者:魏伟 吴希美 李元建
参编:王广基,吴希美,吴春福,张永祥,李元建
页码:185
版本:4
出版时间:2010-05-01
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