将下室加入待测样品或趋化因子,上室加入中性粒细胞时,趋化因子在膜的两侧很快形成浓度梯度,细胞从上室低浓度处向下室穿膜移动。根据迁移细胞的多少来判断趋化活性的强弱。1)取肝素抗凝血清5~10ml,经Ficol分离,得到单个核细胞层和粒细胞红细胞沉淀。将粒细胞红细胞沉淀用低渗氯化铵(0.83%)处理溶解红细胞,即得粒细胞。用DMEM‐5%小牛血清培养液洗细胞2遍,调整细胞浓度2 × 106/ml备用。5)去除上室细胞,将膜取出,甲醇短时间固定,苏木精染色,封片镜检。6)计算流动指数:高倍镜下计数每张膜下表面细胞数,按下式求出移动指数。5)流式细胞仪可分析细胞表型,观察样本所趋化细胞的类型。
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