[生理学]（一）DNA 克隆

DNA 克隆就是应用酶学的方法，在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA 结合成一个具有自我复制能力的DNA 分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞筛选出含有目的基因转化子细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子，即DNA 克隆又称重组DNA，也称分子克隆、基因克隆、基因重组技术。目的DNA 有两种类型：cDNA 和基因组DNA。cDNA 是指在体外经反转录合成的、与RNA（通常指mRNA）互补的单链DNA，经聚合反应，单链cDNA 进而合成双链cDNA。建立基因文库的主要目的就是扩增分离得到各种目的DNA 或cDNA，获得目的基因。需要指出的是所有组织中的DNA 都是相同的，但不同组织、不同细胞的mR NA 种类不同，故cDNA 文库也有所不同。应用时应选用相应的cDNA 文库来克隆目的cDNA。cDNA 文库的另一个发展就是cDNA 表达文库的建立。如果在cDNA 片段插入的上游含有启动子等表达必需的序列，每一个cDNA 克隆在细菌体内就表达为蛋白质，因此可以用抗体来对特定抗原进行免疫学检测筛选，而获得目的蛋白质。