P‐gp为ATP依赖性跨膜转运蛋白,P‐gp的两个核苷(ATP)结合位点都必须结合并水解ATP后P‐gp才能行使其功能,P‐gp每转运一分子底物需要消耗两分子的ATP。因此监测某些作用于不同P‐gp结合位点的药物如维拉帕米、黄体酮与长春碱由P‐gp转运时的ATP酶活性的变化,即可鉴定化合物是否具有P‐gp抑制功能。离子交换HPLC可用于检测ATP与ADP,若使用硫酸氢四丁基季铵盐与磷酸二氢四丁基季铵盐等离子对试剂采用RP‐HPLC法测定可获得更好的重现性与更快的测定速度。