三、RNA的分离纯化

TRIzol试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯仿时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相，离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层（无色）主要为RNA，有机层（黄色）主要为DNA和蛋白质。2）单层培养细胞：直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10c m2面积（即3.5c m直径的培养板）加1ml，用移液器吸打几次。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。配制溶液应使用无RNase的水[将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.01%（V／V），放置过夜，高压灭菌］。