用同位素(3H、14C)标记NOS底物L‐Arg,在反应液中加入NADPH、CaM、四氢生物蝶呤(BH4)等NOS辅助因子,使同位素标记的L‐Arg转化为同位素标记的3H‐Citrulline(瓜氨酸,L‐Cit),然后用Dowex AG50WX‐8(Na +型)分离同位素标记的L‐Cit。并用液体闪烁仪测定。也可用非同位素方法,在转化反应后用高压液相色谱(HPLC)仪直接测定L‐Cit生成率。在各系统和组织的生理尤其在病理条件下也见广泛应用。