Marmur于1961年建立了用酚和氯仿从生物细胞中分离制备DNA的经典方法。从六十年代后半期开始,尤其是蛋白酶K的发现,大大促进了从真核生物细胞中分离提取高分子量DNA的研究。在SDS和EDTA的存在下,蛋白酶K仍具有很高的活力,因而可在抑制DNA降解酶活力的条件下,用蛋白酶K消化去除蛋白质,为制备高纯度、高分子量的DNA制品创造了条件。有时也会因为DNase活性不能充分抑制而引起DNA降解,因此,在用蛋白酶K和去污剂裂解细胞之前,最好先用不含去污剂和蛋白酶的缓冲液,在冰浴中悬浮组织粉。因缓冲液中含有浓度比较高的EDTA,可充分抑制DNase活性,随后再加入蛋白酶K和去污剂裂解细胞,可获得良好结果。
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