用0 ﹒ 5%醋酸以9∶1的比例稀释鼠尾胶原(稀释10倍).从培养瓶取出Caco‐2细胞(细胞至少应达到95%融合,但不应过度生长)。在培养瓶中至少一次加入适当体积(T75培养瓶为12ml)的磷酸盐缓冲‐生理盐水(PBS)进行冲洗.吸出多余液体,将培养瓶(瓶盖松开)置于培养箱5~10分钟(因细胞不同,放置时间不同)。培养时间足够长时,如摇动培养瓶,细胞呈沙状分层结构(若细胞未出现松动,则应继续在胰蛋白酶中培养)。培养瓶中加10ml DMEM,用5ml或10ml移液管上下吸取细胞悬液以便进一步分散细胞。使用无菌移液管取细胞悬液样品1份(100~200μl).B:培养16天的细胞,单层细胞由带有明显清晰刷状缘的柱状细胞组成[ 25 ].
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