等电聚焦是利用蛋白质的等电点的不同,在凝胶中将蛋白质混合物分离开。蛋白质是两性分子,同时拥有酸性和碱性基团。在一定的p H条件下,蛋白质带上一定的电荷。在碱性环境中,酸性基团带负电,而在酸性环境中碱性基团就会带正电。蛋白质的净电荷就是氨基酸侧链中所有负电荷和正电荷的总和。这些净电荷可以绘制在以p H为刻度的图谱上。每一个蛋白质都有一个独特的净电荷曲线。双向电泳最终可获得有数千个蛋白质点的复杂图谱,然后要分析每一块胶的总蛋白点数,凝胶之间的重现性,蛋白点的缺失和出现,胶之间蛋白表达量的变化信息。
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