[文献资料]八、免疫组化方法的基本过程

下面以甲醛灌注固定作冰冻切片的大白鼠脑组织为例介绍ABC方法的主要操作程序。3 ﹒取材和后固定取脑后，先置于上述固定液中后固定一定时间，然后经15%、25%、30%的梯度蔗糖（可用磷酸缓冲液配制）浸泡过夜（4℃），直至组织块下沉到瓶底方可切片，目的是尽量减少组织的水分以防止冰晶。还原型供氢体（DAB）原本无色，当其失去氢后即氧化为具有颜色的“氧化型供氢体”而沉淀于HRP所在的位点上，从而使抗原抗体复合物显示棕黄色。免疫酶组化经DAB显色后为棕黄色沉淀，若用O5O4处理后变为锇黑，具有电子密度，可用于电镜观察。