四、分离细胞悬液的接种密度和活性评估

需要了解悬液中的细胞密度、存活情况和／或制备过程中因损伤而死掉的细胞数或所占比例。如果有荧光显微镜可资使用的话，吖啶橙／溴乙锭（溴化3，8‐二氨基‐5‐已基‐6‐苯基菲啶）方法更为可靠，对活和死细胞都能提供阳性鉴别。吖啶橙通过主动摄取而在活细胞浓集，而溴乙锭通过死亡细胞有漏洞的细胞膜被动积聚，在蓝／紫外光照射下，吖啶橙发出绿色（550nm）细胞核荧光，而溴乙锭则发散橙色（625nm）细胞浆荧光。将两种染料混合于细胞悬液中，活细胞为荧光绿，死细胞为荧光橙。所需器械和用品血细胞计数器，清洁的Dur‐ham试管及10ul玻璃注射器，荧光显微镜，吖啶橙和溴乙锭荧光染料。