脂质过氧化物(LPO)在稀酸中加热水解生成丙二醛(MDA),MDA与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成红色缩合物。反应产物具有荧光,经正丁醇抽提,用荧光分光光度计可测定荧光强度以进行定量分析。四乙氧基丙烷(TEP)与TBA在同样条件下反应也生成具有荧光的红色缩合物,故以它作为标准品。对目前使用的LPO TBA荧光测定法进行改进,血清样本在冰醋酸存在的条件下,100℃水解60min,LPO释放的MDA与TBA形成复合物,用甲醇沉淀血清蛋白质减少非特异性干扰,以λ ex = 515nm、λ em = 550nm测定MDA‐TBA复合物的荧光强度。因此试剂应新鲜配制,且需要在充氮驱氧条件下进行,操作过程麻烦,生物样本(如血浆)需经酶解后萃取。
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