七、三磷酸腺苷酶活性测定方法

钠，钾‐三磷酸腺苷酶（Na ＋，K ＋‐ATP酶）广泛存在于动物的细胞膜上。它分解三磷酸腺苷，释放能量，供Na ＋和K ＋的主动转运，对机体具有重要的生理功能。加50倍体积的预冷的10mmol／L Tris‐HCl缓冲液，用组织匀浆器制成2%匀浆。沉渣用10倍体积冷HS “ B ”液再匀浆，离心（条件相同）。酶反应操作步骤见表7‐10:表7‐10酶反应操作步骤。酶反应管中所含酶制备的蛋白浓度,视酶制备的比活性而定。未经提取的组织匀浆为0.2～0.3mg蛋白／ml，用去法纯化的心、肾酶制备为0.1mg蛋白／ml，而脑酶制备可低到0.01mg蛋白／ml。酶的反应时间和测磷时加显色液后的呈色时间都要准确。