[速览]第一节 树突状细胞的培养与制备

体外诱发的DC又可从CD34 ＋干细胞或单核细胞分化而来。其作法是从捐血中心血库取得白细胞悬液，经由密度梯度离心法取得单核细胞。经过2h贴壁后，用AI M‐V培养，加入I L‐4（1000u／ml）、GM‐CSF（800u／ml），培养6d后，单核细胞会分化成DC。DC主要由骨髓CD34 ＋细胞衍生的，与粒细胞、单核细胞‐巨噬细胞共有一前体细胞即粒细胞‐巨噬细胞集落形成单位（GM‐CFU）。方法如下：分别在不同天数收取以上两种细胞，制成细胞甩片或细胞涂片，20℃保存备用,并作部分Gimesa染色片。取同基因小鼠，无菌开腹取脾细胞，清洗破血去红细胞膜后，制成1ml细胞悬液，尼龙毛柱分离T细胞，调整细胞浓度至2 × 10 9／L备用。