三、蛋白质相互作用的分析

常用的研究蛋白质相互作用的方法有酵母双杂交、亲和层析、免疫沉淀、蛋白质交联等。其中酵母双杂交由于无需分离纯化蛋白质，是一种在细胞内检测蛋白质相互作用的技术，从而成为大规模高通量分析蛋白的主要方法。DNA‐BD的作用是与特异的启动子结合，AD的作用是引导RNA聚合酶Ⅱ复合物，两者靠近并协同作用，才能使DNA结合位点下游的基因得以转录。如果将待测蛋白之一与DNA‐BD融合，蛋白之二与AD融合，若待测的两种蛋白有相互作用，则DNA‐BD和AD靠近并激活报告基因的转录，借此可研究蛋白质间的相互作用。尤其值得指出的是，酵母双杂交所获知的只是蛋白质存在相互作用的一种可能性，还需通过进一步的生物化学试验加以确定和排除。