荧光偏振(fluorescence polarization,FP)方法的理论是基于分子在均相溶液中的自由旋转,当一个荧光标记的分子被一个平面极化光所激发时,其发射光可发射到一个固定的平面,而该发射光的偏振水平与分子的旋转速度成反比。一个分子的偏振值与分子的旋转松弛时间或旋转68.5 °所需时间成正比,旋转松弛时间(θ)与溶液黏度(η)、绝对温度(T)、分子体积(V)、气体常数(R)有关,即:3ηV/RT。现在大多数具备荧光偏振检测的酶标仪都有自动校正功能。