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(四)细胞核及核仁的制备技术

细胞核和核仁的分离制备是研究基因表达和细胞形态结构的首要步骤,以HeLa细胞为例,其方法适用于许多来源的人类细胞。核的酶解液以3500 × g离心5min,上清为核质,沉淀即为粗的核仁部分,用高压带离心可将核仁与核质分离,核的酶解物加到15%、30%蔗糖梯度上17000r/min离心15min,核仁部分完全沉淀于管底,核质分布于梯度中,核仁(沉淀)用1ml缓冲液(0.01mol/L NaCl。除脱下的核外,也含有从圆板上掉下的细胞,处理的方法是吸除上清液,用培养液漂洗1~2次,除去CB后即为制备的核,可用于细胞核成分的分析等研究。脱核离心如果离心速度过高,持续时间过长,可导致细胞丢失,必须引起注意。

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——《药理实验方法学》
书名:《药理实验方法学》
栏目:药理实验方法学 > 第四篇 细胞与分子药理学技术 > 第九章 细胞和亚结构的分离技术与细胞凋亡的测定方法 > 第一节 细胞和亚细胞结构的分离技术 > 二、亚细胞结构分离技术
作者:魏伟 吴希美 李元建
参编:王广基,吴希美,吴春福,张永祥,李元建
页码:259-260
版本:4
出版时间:2010-05-01
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