[速览]二、基本技术的改进

双杂交系统的改进基于某些待测蛋白本身能够激活聚合酶Ⅱ（Pol Ⅱ）的转录，因此，Marsolier等又开发出新型的利用聚合酶Ⅲ（Pol Ⅲ）启动子的系统。蛋白X与Gal 4的BD组成融合蛋白，蛋白Y与TF Ⅲ C的其中一种突变体组成融合蛋白，这种突变体不能与DNA结合，但仍然保持引导TF Ⅲ B与DNA结合的能力。当蛋白X与蛋白Y发生相互作用时，结合在蛋白Y上的TF Ⅲ C就可以引导TF Ⅲ B结合到DNA上并激活报告基因的转录。当蛋白X和蛋白Y发生相互作用时，突变的Nub能够与Cub重新组合成具有活性的泛素，切断和释放报告蛋白。