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一、DNA的分离与纯化

将分散好的真核生物组织在含SDS和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质。破坏细胞膜、核膜,SDS可使组织蛋白与DNA分子分离,EDTA能抑制细胞中DNase的活性,使DNA分子完整地以可溶形式存在于溶液中,再用酚、氯仿/异戊醇抽提除去蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀进一步纯化,为获得高纯度DNA,操作中常加入RNase除去RNA。从全血制备白细胞DNA,可用非离子去污剂Triton X‐100直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜,释出血红蛋白及细胞核,在反应体系中含一定浓度蔗糖,维护核膜内外的渗透压,以防止核膜破裂,通过离心等手段即可获得白细胞的细胞核。

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——《药理实验方法学》
书名:《药理实验方法学》
栏目:药理实验方法学 > 第四篇 细胞与分子药理学技术 > 第十章 分子药理学技术 > 第一节 核酸的分离、纯化与基因克隆
作者:魏伟 吴希美 李元建
参编:王广基,吴希美,吴春福,张永祥,李元建
页码:274-276
版本:4
出版时间:2010-05-01
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