化甘油磷酸化，生成α-磷酸甘油反应的酶。参与甘油的代谢。由血液运送至肝、肾、肠等组织的甘油，在肝甘油激酶作用下，转变为3-磷酸甘油，然后脱氢生成磷酸二羟丙酮，循糖代谢途径进行分解或转变为糖。脂肪细胞及骨骼肌等组织因甘油激酶活力很低，不能利用甘油合成脂肪。
