为什么ELISA操作中必须洗涤充分？

答：洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但一定程度上影响检测结果的准确性。通过充分洗涤才能达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。洗涤的方法除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外，手工操作有流水冲洗式和浸泡式两种。

1. 流水冲洗式最初用于小珠载体的洗涤，洗涤液为蒸馏水、自来水，其洗涤效果更为彻底，且也简便、快速。流水冲洗式同样适用于微量滴定板的洗涤，让水流冲击板孔表面，洗涤效果更佳。
2. 浸泡式是微量滴定板洗涤最常采用的方式，洗涤液为非离子型的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离子型洗涤剂既含有疏水基团，也含有亲水基团，使蛋白质回复到水溶液状态，从而脱离固相载体。

在ELISA操作中，洗涤是非常关键的步骤。它可以清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性吸附的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，所以必须充分洗涤才可以把这种非特异性吸附的干扰物质有效洗涤下来，从而防止产生假阳性。