硝酸盐试验的原理是什么？反应可能出现哪几种情况？

答：硝酸盐（NO₃）被还原为亚硝酸盐（NO₂），与醋酸盐作用生成亚硝酸。亚硝酸与对氨基苯磺酸作用，生成偶氮苯磺酸，后者与α-萘胺结合为红色的N-α-萘胺偶氮苯磺酸。一般有以下几种情况：①NO₃-NO₂：即还原硝酸盐为亚硝酸盐，如大肠埃希菌等。②NO₃-N₂或其他产物（如N₂O、NH₂OH、NH₃）；不再存在亚硝酸盐，又称脱硝化作用。如沙雷菌属和假单胞菌属。这种结果，硝酸盐还原结果可以阴性，须用2种方法才能表达：一是锌粉证实试验，可于培养液中加入少许锌粉，如出现红色证明产生芳香肼，表示NO₃仍存在证明NO₃未被还原。另外一种方法是如NO₃被还原成N₂，可在硝酸盐培养基中加一小导管（发酵管），如有气体产生则说明NO₃被还原成N₂。③NO₂-N₂或其他产物：有些细菌不能还原硝酸盐，但能还原亚硝酸盐。须用亚硝酸盐还原试验才能测出。硝酸盐还原试验应用十分广泛，肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐，非发酵菌中有的能产生氮气如铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、斯氏假单胞菌；有的则能将硝酸盐还原成为亚硝酸盐，如类鼻疽伯克菌等。硝酸盐还原过程可因细菌不同而异，借此可予以鉴别。