将主种子批毒种作1 ∶ 5稀释,分别注射10只恒河猴的两侧丘脑各0.5ml和腰部脊髓内0.2ml。对照组用强毒SA 14株稀释成10 2 PFU/ml和10 3 PFU/ml病毒量,以同法接种恒河猴,每个稀释度注射4只恒河猴。对SA 14‐14‐2减毒组的10只恒河猴观察至少18天,应无任何临床症状,组织学检查仅表现为注射部位、脑和脊髓有轻微的炎症反应。而对照组SA 14株在注射后8天内病毒量10 3 PFU/ml组的4只恒河猴应全部死亡。组织学检查表现主要特征为神经细胞坏死,较少炎症反应。小鼠脑内毒力应不高于3.01 g LD 50/0.03 m l,同时以10 - 1病鼠脑悬液皮下注射体重为10~12 g小鼠10只,每只0.1ml,观察14天,应全部健存。
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