方案四 PCR-RFLP检测

本方案以检测水中的隐孢子虫为例介绍PCR-RFLP方法的应用。隐孢子虫为人体的重要寄生孢子虫，其发病率在寄生虫性腹泻中占首位或第二位。在国内腹泻患者（多为儿童）中，隐孢子虫的检出率为1.36%～13.3%。所选案例仅与待酶切的基因（即扩增的区段）有关，其他病原体的操作，仅在待酶切基因选择方面有不同。每个PCR反应准备以下体系：10 μ l 10 × PCR缓冲液，16 μ l dNTPs，2.5 μ l上游引物，2.5 μ l下游引物，6 μ l MgCl2，4 μ l牛血清白蛋白，57.5 μ l双蒸水 ......