[发病机制]二、表达双链RNA 载体的构建

双链RNA若在体外构建，用脂质体转染细胞，但转化到细胞内的双链RNA半衰期短，效果差。因为RNA多聚酶Ⅲ认识U6或T7启动子，认识特殊的转录终止信号，当RNA多聚酶Ⅲ遇到连续5个胸腺嘧啶时，它指导的转录就会终止，转录产物在第二个尿嘧啶处被切下来，合成的RNA的3 ′‐末端无poly A。1），插入到Blue script载体中，再设计和合成与片段1反向的重复序列，并在其下游连接5个胸腺嘧啶，称为片段2。将载体转移到细胞内，转录出的RNA具有回文序列，会形成一个发夹样结构，从而得到了双链RNA（图2‐1‐。 ......