[辅助检查]第四节 外源基因原核表达的基本操作

外源基因在原核细胞中表达的基本操作一般包括以下几个步骤：获得目的基因、目的基因克隆入载体、表达载体转化细胞（细菌）、转化细胞（细菌）的培养或发酵、目标产物的分离与纯化、目标产物的鉴定。本实验以一种新型人肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha，TNF α）在大肠埃希菌中的表达为例予以说明。其实验流程如图7-5所示。基因工程药物的生产在获得了工程菌后，还有大量的中下游工作要做，这些工作包括：工程菌的传代与保存、工程菌的中试及生产规模（发酵工程）的培养工艺、蛋白质表达水平在规模化 ......