一、LCR 的原理和方法

LCR技术是以DNA连接酶将某一DNA链的5 ′磷酸与另一相邻链3 ′羟基连接为基础的，即利用DNA连接酶构建共磷酸键，特异地连接双链DNA，经变性、退火和连接等步骤的反复温度循环，从而使目标DNA大量扩增。在模板DNA、DNA连接酶、寡核苷酸引物以及相应条件下，首先加热至一定温度使DNA变性，分开双链DNA，然后降温退火，使引物和与之互补的模板DNA杂交。如果与靶DNA杂交的相邻的寡核苷酸与靶DNA完全互补，DNA连接酶即可修复两者之间的缺口。现已清楚，T ﹒ thermophilus DNA连接酶的编 ......