获得目的基因后,与合适的载体连接,构建重组质粒,转化大肠杆菌,即可获得工程菌。由于包涵体中的重组蛋白缺乏生物学活性,加上剧烈的处理条件,使蛋白的高级结构破坏,因此重组蛋白的复性特别必要,但是不是所有的蛋白都是那么容易复性的。在测定活性之前关键的一步就是要促进对目的蛋白正确折叠,使其处于天然状态的空间构象,这样才能保证蛋白质的活性。将透析好的上清和沉淀分别跑SDS-PAGE ,发现沉淀是我的目的蛋白,且很浓,这些沉淀该怎么办,再变性复性肯定还会沉淀,该如何优化纯化步骤呢? ......