2006年下半年,我开始做Western blotting实验。我后来发现一个小窍门,就是可以把fg级发光试剂和普通pg级发光试剂掺和着用,这样可能会增强目的蛋白的亮度而背景又不至于太强,同时也节约试剂成本,但具体比例需要摸索。推荐用大一点培养皿(如直径为150mm )洗,可以洗得很充分,每次加足量缓冲液并且洗膜时间要充分,一般至少3次,如果背景仍高还可再增加洗膜次数或时间。在Western blotting实验中,需要购买高质量试剂和掌握一套标准操作规程,有时掌握一些实验技巧也可使我们的WB实验结果更佳 ......