X -射线结晶学方法( X-ray crystallography )是结构生物学研究中最有效方法之一。要想得到一个完美蛋白质晶体,就像种庄稼一样,不仅仅要有优良种子,即大量高纯度蛋白质,而且要有适合种子茁壮成长的肥沃土壤(合适结晶条件) 。此蛋白在细菌中表达较高,在纯化蛋白质过程中,我用的是蛋白质变性和复性方法,此法可以得到高纯度蛋白质。此法操作过程中,先是用含6mol/L尿素溶液去变性蛋白质,让蛋白质结合在Ni-NTA亲和柱上,洗净亲和柱,再用6 → 0mol/L尿素梯度去复性蛋白质。利用蛋白质变性和 ......