四、实时定量PCR常见问题及优化方案

实时定量PCR与传统PCR相比具有特异性强、重复性好、灵敏度高的特点。但实时定量PCR较传统PCR更复杂，影响因素有更多方面。避免引物或探针降解，可在进行实时定量PCR实验前通过电泳检测其完整性。实时定量PCR由于使用了荧光物质作为定量工具，敏感度通常能达到102拷贝/ ml，而且线性范围很宽，为0～1011拷贝/ ml。影响实时定量PCR敏感性的因素众多，除了对一般PCR反应均存在的影响因素（如反应体系、Taq酶的活性）之外，还需注意：1 .特异性产物与引物二聚体竞争荧光染料SYBR Green，从而降 ......