[辅助检查]三、实时定量PCR的实验流程

检查比对序列，先选择好探针的位置，然后设计引物使其尽可能地靠近探针。探针的设计原则是：①尽可能短，不要超过30bp。选择胞苷酸(C)多于鸟苷酸(G)的链作探针, G的含量多于C会降低反应效率。PCR反应需要在实时定量PCR仪专用反应板或管中进行，加入所有反应试剂后，将反应板置入仪器内，按照仪器操作说明完成反应和数据记录。运用数学公式［ ? ? Ct =（Ct目的基因-Ct内参基因）实验组-（Ct目的基因-Ct内参基因）对照］来计算相对量，Ct是热循环仪检测到达设定的阈值荧光信号时所经历的循环数。所以，2- ......