二、功能基因的克隆方案

基因克隆的过程可以分为四个步骤，首先是高质量DNA或mRNA的提取，其次是进行PCR扩增或筛选基因文库，然后是克隆的测序、序列分析和初步鉴定，最后对所克隆的基因进行表达分析以确认其功能。实验时间从筛选cDNA文库的数星期缩短到1 ～ 2天，其次，筛选cDNA文库每次只能回收少数cDNA克隆，而RACE能产生大量的独立克隆，故可以用于证实序列的完整性，分析选择性剪接等。同时，与RDA相比， SSH只进行一轮杂交循环，差异基因的富集程度较低，特别是当tester与driver两群体间的差异较小时，仅一轮杂交将 ......