三、探针的标记

DNA交互配对反应需使用有标记的探针（DNAlabeling）。DNA探针制备的方法有很多种：第一种是缺口平移（nicktranslation）。双股DNA先以DNase Ⅰ处理，在镁离子存在下，DNase Ⅰ会将DNA在不同的地方造成缺口，然后加入大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅰ，利用其5 ’至3 ’单股外切酶的活性，将缺口处的DNA切掉一部分，产生一较大的单股空隙，并利用其聚合酶的活性将空隙补上。制备寡核苷酸探针，通常都以脱氧核苷酰末端转移酶或激酶来进行标记。至于放射性同位素的使用，除了进行磷酸化（kinas ......