用物理或化学方法对宿主细胞进行处理,使之处于易于接纳外源DNA分子的状态,这种细胞称作感受态细胞(competent cell)。使大肠埃希菌成为感受态细胞的方法有多种,其中氯化钙(CaCl2)法是目前最常用的方法,其基本流程见实验流程2-2。从中可以看到几个关键点:①处于生长最旺盛时期的大肠埃希菌才能用于制备感受态细胞,即经复苏后的大肠埃希菌按1 / 100接种,LB培养基(Luria-Bertani medium),37℃振荡培养2~3小时,在600nm波长的光密度值(OD600)在0.5左右的细菌。 ......