另一种确定蛋白质半衰期的方法是放线菌酮阻断法。放线菌酮(cycloheximide)是一种真核生物蛋白质合成抑制剂,它是通过抑制蛋白质合成过程的移位步骤阻止翻译的进行。该方法尤为适用于一些难以进行代谢标记的蛋白质半衰期确定。相对于脉冲追踪标记法,放线菌酮阻断法不需要接触放射性物质,因此是脉冲追踪标记法的有效替代方法。2 .加入放线菌酮至终浓度为35 μ g/ml(或者通过预实验确定放线菌酮抑制蛋白合成又不明显抑制细胞生长的浓度)。放线菌酮的使用浓度要控制在合适浓度,过高会导致细胞生长受影响。 ......