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[诊断]四、变性梯度凝胶电泳法(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)

双链DNA在递增的变性剂浓度梯度或温度梯度中电泳时, DNA不同区段可根据不同的解链温度( Tm )而解离。通过在一条引物5 ′端加入一个40 ~ 50bp的G - C钳,作为最高解链温度区( Tm为95 ℃ ) ,从而在解链的过程中阻止DNA双链完全解链。杂交体中碱基的错配会造成相应区段的不稳定,致使同源体和杂交体之间相应区段的Tm差异达6 ℃ 。这样,野生型和突变型单链所形成的杂交体即可被区分出来,野生型表现为一条带,而突变型最多可形成4条带( 2条同源双链, 2条异源双链) 。DGGE在分析每一特定 ......

——《耐药结核病学》
书名:《耐药结核病学》
栏目:耐药结核病学 > 临床篇 > 第十章 耐药结核病的基因型诊断方法 > 第四节 其他基因诊断方法
作者:唐神结 许绍发 李亮
参编:
页码:113-114
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2014-08-01
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