焦磷酸测序(pyrosequencing)是一种基于发光法测定焦磷酸(PPi)的测序技术,其原理如图3-4所示:① 1条特异性测序引物与单链模板DNA退火后,加入酶混合物和底物混合物。其中酶混合物中包括DNA聚合酶(polymerase)、三磷酸腺苷硫酸化酶(ATP sulfurylase)、荧光素酶(luciferase)和三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase),底物混合物中包括5 ′-磷酸化硫酸腺苷(adenosine 5 ′-sul-phatophosphate APS)和荧光素(luciferin) ......