[概述]第一节 常规PCR 中的特殊步骤

PCR中特殊步骤的基本原理：前面已经提到，PCR是体外模拟细胞内DNA的自然复制过程，包含变性、退火及延伸三个基本步骤。如果在未曾研究过的物种中进行基因克隆，则可以通过设计简并引物来完成。而在人为地使用非优化的反应条件时，可以使扩增的非特异性增加，引入错配碱基，达到产生突变的目的。如针对简并引物各种可能的退火温度，设计不同的退火温度进行尝试。具体来讲，就是在梯度PCR上设置退火温度时立即进行选择项，使用“ Gradient ”程序，并依据引物的各种退火情况设置温度范围，则在反应板上不同的行（或列）就对应着 ......