[辅助检查]第六节 大量质粒DNA制备

从大规模（500ml）的细菌培养物中分离质粒DNA，所获得的质粒进行进一步纯化，以获得大量的质粒DNA。多年来，一直认为在氯霉素存在下扩增质粒只对生长在基本培养基上的细菌有效，然而在带有pMBl或ColEl复制子的高拷贝数质粒的大肠杆菌菌株中，采用以下步骤可提高产量至每500ml培养物获得2～5mg质粒DNA，而且重复性也很好。新一代的质粒（如pUC质粒）可复制达到很高的拷贝数，因此无需使用这一步进行扩增，这些质粒只要从生长达到饱和的细菌培养物即可大量提纯。但用氯霉素进行处理，具有抑制细菌复制的优点，可减 ......