[文献资料]实验十 半抗原标记c RNA探针原位杂交组织化学染色

掌握应用半抗原标记cRNA探针原位杂交组织化学染色显示组织或细胞内mRNA的原理和实验步骤。在以体外转录方式合成cRNA探针时，如在转录体系中加入地高辛标记的r NTP原料，则能合成带有地高辛的cRNA探针，其中与待测mRNA序列互补的反义cRNA探针按照碱基配对原则与待测mRNA结合形成杂交体，然后用碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体与杂交体上的地高辛进行免疫反应。杂交液配制:在杂交缓冲液中加入适量地高辛标记反义cRNA探针,使探针终浓度为0.5～1 μ g／ml，空白对照不加探针，阴性对照加入相同浓度地高辛 ......