使用Ficoil密度梯度离心法收集外周血单个核细胞。将PBS液1 ∶ 1稀释的抗凝血液沿管壁小心加入已加入淋巴细胞分离液的离心管中,使抗凝血液位于分离液上层,抗凝血液与淋巴细胞分离液比为5 ∶ 3。分离液与最上层交界部呈云雾状,此层主要含单个核细胞。置于5%二氧化碳、饱和湿度、37℃培养箱中培养4天,用0.01 mol/L PBS液洗掉非贴壁细胞,换培养液继续培养9~14天,每3天更换培养液一次。 ......