十二、血 清 封 闭

在免疫组化染色时，加入的一抗（蛋白质）容易被带电荷的结缔组织所吸附，造成非特异性背景染色。实际上，目前所用的商品化一抗尤其是单克隆抗体特异性和纯度较高，不会与组织细胞中非抗原决定簇结合，因此，一般不需要进行血清封闭处理，但为了避免抗体不纯或自行配制一抗稀释液等因素，尤其是多克隆抗体染色，往往会用血清封闭步骤。许多检测试剂盒如EnVision等没有配备正常血清，因此，在加一抗前也就不需要加正常血清封闭。因封闭血清和组织的结合不牢固，所以滴加血清孵育切片后，用PBS洗去血清，再加一抗，则血清与组织的结合会因P ......