筛选与鉴定程序主要包括:先筛选出带有载体的克隆。主要筛选和鉴定方法有遗传标志筛选法、序列特异性筛选法、亲和筛选法等。利用抗性基因的“插入失活”可筛选带有重组载体的克隆:诸多载体都带有抗生素抗性基因,当外源DNA插入某一抗性基因内,便可使该抗性基因失活。互补筛选利用了β-半乳糖苷酶功能互补的基因片段: pUC、pGEM及M13mp等载体系列均携带β-半乳糖苷酶N端146个氨基酸残基(α片段)的编码序列,在该序列中含有多克隆位点。针对初筛为阳性的克隆,提取其重组DNA,以合适的限制性内切酶进行消化,经琼脂糖凝 ......